1.准确称量试剂:根据培养基的配方要求,准确称量所需的各种化学药品。确保所用化学试剂的纯度,因为不纯的试剂可能影响细胞的生长。
2.校正pH值:将称量好的试剂放入容器内,加入适量的蒸馏水后加热溶解,并不断搅拌以确保混合均匀。使用pH试纸或酸度计测定酸碱度,并根据需要用1N NaOH或1N HCl调节至适宜的pH值范围(一般为7.2~7.6)。
3.过滤:将调整好pH值的培养基通过过滤器过滤,以去除杂质和微生物。过滤时可使用纱布夹棉花或滤纸进行初步过滤,随后可能需要使用更精细的过滤设备以确保无菌。
4.ScienCell培养基分装:将过滤后的培养基分装到试管或三角瓶中,通常使用无菌操作技术来避免污染。分装后的培养基需要进行高压蒸汽灭菌,以确保无菌。灭菌条件一般是15磅/平方英寸的压力下,温度达到121.3℃,持续20~30分钟。
5.保存:灭菌后的培养基应存放在4℃低温环境中,避免阳光直射和冻结,以保证其稳定性和有效性。打开后的培养基建议在一个月内使用完毕,以保证细胞培养的效果。
综上所述,ScienCell培养基的制备是一个涉及多个精确步骤的过程,从准确称量试剂到最终的储存和使用,每一步都需要严格控制条件以确保培养基的质量和效果。