Promocell培养基的管理与使用是细胞培养实验成功的关键之一，涉及储存、配制、无菌操作、日常维护等多个环节。以下是详细的规范和注意事项：

　　一、Promocell培养基储存管理

　　1.温度控制

　　未开封时：根据说明书要求存放于2℃~8℃冰箱（冷藏），避免冷冻导致成分变性或沉淀析出。部分特殊培养基可能需要避光保存（如含血清或光敏感添加剂）。

　　已开封后：短期使用的瓶口需用75%酒精擦拭消毒，并尽快放回冰箱；长期不用的剩余培养基应标记开封日期，优先使用旧批次以减少降解风险。

　　注意：反复冻融会破坏生长因子活性，严禁将大包装分装后多次解冻！建议按实验需求量分装成小管冷冻保存（-20℃），使用时单向融化取用。

　　2.有效期监控

　　严格遵循包装标注的有效期限，过期产品即使未用完也不可继续使用。若发现颜色异常、浑浊或沉淀增多，提前报废处理。

　　对于添加了抗生素（如青霉素/链霉素）的培养基，更需关注有效期，因抗生素效力会随时间下降。

　　3.防污染措施

　　储存区域专用于培养基存放，远离挥发性化学品、强酸强碱等污染物。不同种类的培养基分开放置，避免交叉混淆。

　　定期清理冰箱，丢弃废弃容器并消毒货架，防止霉菌滋生污染库存。

　　二、Promocell培养基使用前准备

　　1.预热与平衡

　　从冰箱取出后置于室温下回暖至约37℃（哺乳动物细胞适用），或根据目标细胞类型调整至适宜温度。可直接水浴加热但避免剧烈震荡产生气泡。

　　使用前轻轻颠倒混匀数次，确保添加物均匀分布（尤其含血清或碳酸氢钠的培养基易分层）。

　　2.补充成分添加

　　血清/FBS：胎牛血清需灭活后按需比例加入（通常5%~20%），注意不同批号血清的性能差异可能影响实验结果一致性。

　　双抗溶液：若基础培养基不含抗生素，则每100mL添加1mL青链霉素混合液（终浓度约100U/mL）。

　　其他因子：如谷氨酰胺、丙酮酸钠等不稳定成分应在临用前现配，避免长时间暴露失效。

　　3.pH校准验证

　　用精密pH计检测调整后的酸碱度是否符合目标范围。可用CO培养箱内的缓冲体系自然平衡，或微量滴加NaOH/HCl调节。

　　新旧培养基对比测试：观察指示剂颜色变化判断是否需要进一步调校。

　　三、Promocell培养基无菌操作规范

　　1.生物安全柜内作业

　　所有涉及开放瓶口的操作必须在层流超净工作台中进行，包括倒取、移液、混合等步骤。操作前紫外照射30分钟并开启风机运行至少5分钟驱散臭氧残留。

　　穿戴适当的个人防护装备（实验服、手套、口罩），减少人为引入污染的风险。

　　2.避免微生物污染

　　严禁直接用手触碰瓶口内部，倾倒时倾斜瓶身让液体沿壁流下，避免垂直倒入产生飞溅。吸管尖*不应接触瓶内未使用的液体部分。

　　每次取用后立即旋紧瓶盖，并用70%酒精擦拭外表面消毒后再归位。疑似污染的培养基应立即高压灭菌处理。

　　3.过滤除菌必要性

　　对于自制培养基或补充新鲜成分的情况，必须经过0.22μm滤膜过滤除菌后方可使用。市售预混培养基通常已灭菌处理，但仍建议一次使用时做无菌测试（如涂布平板法确认无杂菌生长）。